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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
含糖子主观能动性的繁杂性和非常多N-glycoproteins低体现技术水平随着对N-glycosylation格局特征的分析方式方法的描术甚为有难度。在检测工具低丰度的N糖基化遮盖球氨基酸质质或肽段时,进来掺入许多未遮盖的球氨基酸质质肽断,这很易于将低丰度的糖基化遮盖球氨基酸质质肽段的信号灯消除。凝素亲和法是近几年糖球氨基酸质质质组学中操作范围广泛的离心分离聚集方式方法。凝集素(lectin)不是类糖切合球氨基酸质质质,能专心正常识别某些层次性格局特征的单糖或聚糖中某些的糖基回文序列而与之切合,这些食品与糖链可逆反应非共价切合,糖球氨基酸质质或糖肽被凝集素猎取在此之后,常常用某些的单糖进行竞争者切合凝集素将糖球氨基酸质质或糖肽冲洗掉了。 淀粉酶质由酶解后再生灵活运用凝集素(lectin)生物富集N-糖基化肽段,接下来用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中切去联系在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该加工因受Asn碳原子量多2.9890Da。最好用高准确度LC-MS质谱仪测试脱糖后的肽段,依据搜索数据报告库,核对脱糖后碳原子量两者认识论碳原子量的变幻及糖基化突显肽段的编码序列,才能断定该淀粉酶质的N-糖基化位点。N-糖基化位点断定此后,再再生灵活运用label-free的的原理对其确定参考值研究分析。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
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